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組織切片是病理學(xué)診斷上面必要的過程，但你以為檢體只有做成石蠟包埋切片，然后染H&E染色后診斷一個(gè)方法嗎?其實(shí)在組織病理上還有很多不同的包埋及切片方法，配上各種原理不同的染色法，就可以進(jìn)行各式各樣的組織分析。***，我們整理了常用的組織病理學(xué)切片技術(shù)及染色方法，供大家對(duì)切片技術(shù)上有更多的認(rèn)識(shí)~因應(yīng)各種不同的診斷及實(shí)驗(yàn)需求，選擇適合的染色，才能取得比較好的結(jié)果。????H&E：觀察組織「形態(tài)」的標(biāo)準(zhǔn)染色方法，是組織學(xué)中**重要、**常被使用的化學(xué)染色方法。????特殊化學(xué)染色：種類繁多，針對(duì)各種不同的組織細(xì)胞生化特性，有多種不同的染色可以應(yīng)用。常見的染色方法包括蘇木精-伊紅染色（H&E）。南京Masson染色外包

魯士藍(lán)染色（Prussian Blue Staining）是一種常用的組織化學(xué)染色方法，主要用于檢測和定位組織中的鐵沉積。這種染色方法能夠?qū)⑷齼r(jià)鐵離子（Fe??）還原為二價(jià)鐵離子（Fe??），并與亞鐵**鉀反應(yīng)生成不溶性的藍(lán)色沉淀物——普魯士藍(lán)（Prussian Blue）。這種方法在病理學(xué)、血液學(xué)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。魯士藍(lán)染色的基本原理1. 鐵離子的還原：?在酸性條件下，三價(jià)鐵離子（Fe??）被還原成二價(jià)鐵離子（Fe??）。2. 與亞鐵**鉀反應(yīng)：?二價(jià)鐵離子（Fe??）與亞鐵**鉀（K?[Fe(CN)?]）反應(yīng)，生成不溶性的普魯士藍(lán)沉淀物。?反應(yīng)方程式：[ ext{Fe}^{2+} + K_4[ ext{Fe(CN)}_6] ightarrow ext{Fe}_4[ ext{Fe(CN)}_6]_3 + 4K^+ ]南京免疫熒光染色結(jié)果分析Periodic Acid-Schiff (PAS)染色用于檢測糖類物質(zhì)。

病理染色切片過程中值得注意的是1％伊紅水溶液是理想的胞漿染液。要選擇好水溶性的伊紅染料使胞質(zhì)鮮艷一些，切片不但漂亮且利于觀片。(9)切片染色后的脫水要充分，每道乙醇脫水的時(shí)間不要過短，尤其是三道無水乙醇更為如此。無水乙醇要勤更換。(10)切片經(jīng)***一次無水乙醇后盡快地放人二甲苯中。在夏季室內(nèi)濕度較大的環(huán)境中更是如此。如切片在濕度大的空氣中停留時(shí)間過長就會(huì)在封片時(shí)產(chǎn)生霧氣，而不能現(xiàn)片。其原因是無水乙醇吸收了空氣中的水汽，在二甲苯中難以分離析出，當(dāng)用中性樹膠封片后，二甲苯揮發(fā)，而水汽留在膠中產(chǎn)生霧氣。(11)封片所使蓋玻片需大小合適、清潔。樹膠用量視蓋玻片大小而定，要求不發(fā)生溢膠或缺如。(12)不提倡切片經(jīng)無水乙醇，然后干燥，直接用中性樹膠封固。這樣會(huì)產(chǎn)生人為的細(xì)小黑點(diǎn)，與細(xì)胞核相似。(13)封片要在通風(fēng)廚中進(jìn)行，防止二甲苯污染工作間，危害技師的身體。

3. 普魯士藍(lán)反應(yīng)：?用蒸餾水清洗切片后，將其浸入含有亞鐵**鉀（K?[Fe(CN)?]）的溶液中，在室溫下孵育一段時(shí)間（通常是10-20分鐘），形成普魯士藍(lán)沉淀。4. 復(fù)染：?為了更好地觀察組織結(jié)構(gòu)，通常會(huì)進(jìn)行復(fù)染，例如使用蘇木精染色（Hematoxylin）。5. 脫水、透明和封片：?用乙醇梯度脫水，然后用二甲苯透明處理，***用中性樹膠封片。6. 顯微鏡觀察：?在顯微鏡下觀察染色后的切片，藍(lán)色沉淀表示鐵的存在。優(yōu)點(diǎn)?特異性高：魯士藍(lán)染色對(duì)鐵離子具有高度特異性，能夠準(zhǔn)確地檢測和定位鐵沉積。?操作簡便：染色步驟相對(duì)簡單，不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備。?結(jié)果直觀：染色后的鐵沉積呈現(xiàn)明顯的藍(lán)色，易于觀察和分析。Nissl染色用于顯示神經(jīng)元的尼氏體。

比如Masson染色：?原理：利用不同染料區(qū)分肌肉、膠原纖維和細(xì)胞質(zhì)。通常，肌肉染成紅色，膠原纖維染成藍(lán)色或綠色，細(xì)胞質(zhì)染成紅色。?應(yīng)用：用于研究結(jié)締組織和纖維化病變。1.PAS染色（過碘酸-Schiff反應(yīng)）：?原理：檢測糖原和其他多糖類物質(zhì)，使其呈現(xiàn)紫紅色。?應(yīng)用：用于診斷糖原貯積病和******。1.銀染色：?原理：利用銀鹽沉淀顯示神經(jīng)纖維和細(xì)胞外基質(zhì)。?應(yīng)用：用于神經(jīng)組織和結(jié)締組織的研究。

英瀚斯生物熟練掌握多種常規(guī)染色和特殊染色技術(shù)。 Von Kossa染色用于檢測鈣鹽沉積。南京Van Gieson染色結(jié)果分析

染色切片可以幫助識(shí)別病原體。南京Masson染色外包

病理染色的主要步驟?取材：從***或尸體上獲取所需的組織樣本。?固定：使用福爾馬林或其他固定劑固定組織，以保持其原有的結(jié)構(gòu)。?脫水：用酒精或其他脫水劑去除組織中的水分。?透明化：用二甲苯或其他透明劑處理組織，使其透明。?包埋：將透明化的組織放入石蠟中，制成硬塊。?切片：用切片機(jī)將石蠟塊切成薄片（通常為4-5微米厚）。?貼片：將切片貼在載玻片上，并進(jìn)行烘烤使其牢固。?脫蠟：用二甲苯去除切片上的石蠟。?復(fù)水：用酒精梯度逐步將切片重新水化。?染色：根據(jù)需要選擇合適的染色方法進(jìn)行染色。?封片：用封片劑覆蓋切片，防止染色脫落，并便于長期保存和觀察。南京Masson染色外包